客西马尼位于耶路撒冷东边，在汲沦谷对面（约18:1），橄榄山上或附近（路22:39）。

客西马尼园的具体地点无法确定，因为（据约瑟夫斯记载）公元70年罗马军队包围耶路撒冷期间，城四周的所有树木都被砍掉了。（《犹太战记》第6卷5-8节［1章1段］）一个传统说法认为，客西马尼的旧址在方济各会于1848年圈起的一个园子里。园子的面积是46米乘43米（150英尺乘140英尺），位于橄榄山脚下，在西面斜坡上的岔口。