Dalam pembagian Tanah Perjanjian, Isakhar adalah suku keempat yang terpilih melalui pengundian untuk menerima milik pusakanya; dan ternyata, sebagian besar daerah Isakhar terletak di Lembah Yizreel yang subur. Yang menjadi batas daerah Isakhar adalah daerah suku Zebulon dan Naftali di sebelah utara, S. Yordan di sebelah timur, daerah Manasye di sebelah selatan, dan di sebelah barat, sebagian daerah milik Asyer. Gunung Tabor terletak pada garis batas utara yang memisahkannya dengan Zebulon, sedangkan kota Megido terletak dekat perbatasan barat daya dan Bet-syean terletak di dekat perbatasannya di sebelah tenggara. Di daerah itu terdapat sejumlah kota orang Kanaan dan anak-anak kotanya. (Yos 17:10; 19:17-23) Di lembah yang indah itulah suku Isakhar, sesuai dengan berkat Musa, ’bersukacita dalam kemah-kemah mereka’.—Ul 33:18.

Ada beberapa kota dalam daerah Isakhar yang ditentukan sebagai kota terpisah milik suku Manasye yang bertetangga dengannya, di antaranya adalah kota Megido dan Bet-syean yang penting. (Yos 17:11) Di daerah Isakhar, ada juga sejumlah kota berikut tanah penggembalaan di sekitarnya yang disisihkan untuk suku Lewi. (Yos 21:6, 28, 29; 1Taw 6:62, 71-73)