När Barnabas och Saul (Paulus) hade fullgjort sitt uppdrag att lämna understödet i Jerusalem, ”vände de tillbaka och tog med sig Johannes, som hade tillnamnet Markus”. Det verkar som om Markus var med som deras medhjälpare och kanske tog hand om de praktiska uppgifterna under deras resa. (Apg 12:25; 13:5) Men när de kom till Perge i Pamfylien drog sig Johannes Markus av någon orsak undan från dem och ”vände åter till Jerusalem”. (Apg 13:13) När Paulus längre fram skulle ge sig av på sin andra missionsresa, ville Barnabas gärna ta med Markus, men Paulus ”ansåg det inte lämpligt att ta med sig honom, eftersom han hade gett sig av från dem i Pamfylien och inte hade gått med dem till arbetet”. Det uppstod då en ”skarp motsättning”, och de skildes åt. Barnabas tog med sig Markus till Cypern, medan Paulus tog med sig Silas och gav sig av till Syrien och Kilikien. (Apg 15:36–41)

Markus var Barnabas kusin och reskamrat. Han reste också tillsammans med andra missionärer bland de första kristna,